本周hzangs在最新文獻中選取了10篇分享給大家，第1篇文章提出了利用化學探針微陣列的策略捕獲和分析細胞外囊泡；第2篇文章主要介紹了现在死亡細胞來源的不同類型的細胞外囊泡及功能；第3篇文章提出了一種細胞外囊泡形成的原位可視化策略；第5篇文章探討了Superose 6作為凝膠排阻層析用於細胞外囊泡分離的優勢；第9篇文章提出了使用工程化中性粒細胞來源細胞外囊泡改善阿爾茨海默病。

1.High-throughput capture and in situ protein analysis of extracellular vesicles by chemical probe-based array. 

顺利获得基於化學探針的陣列對細胞外囊泡進行高通量捕獲和原位蛋白質分析。

[Nat Protoc] PMID: 39438698

摘要：細胞外囊泡（EV）是具有磷脂雙層的小顆粒，攜帶各種貨物，包括核酸、蛋白質和代謝物。細胞外囊泡在各種細胞過程中起着重要作用，並因其在細胞間通信中的普遍作用以及在治療和診斷中的潛在應用而日益受到認可。儘管已經開發了許多用於表徵和測量細胞外囊泡的方法，但從生物流體中分析細胞外囊泡在吞吐量和靈敏度方面仍然是一個挑戰。最近，韦德国际引入了一種方法，可以促進從痕量樣本中高通量分析細胞外囊泡。在這種方法中，將兩親性樹枝狀大分子超分子探針（ADSP）塗覆在硝化纖維膜上，用於基於陣列的捕獲，並實現原位免疫印跡分析。在這裏，韦德国际描述了基於陣列的EV分析方法。韦德国际描述了該方法的增強版本，該版本包含一個自動打印工作站，可確保高吞吐量和可重複性。韦德国际進一步證明了使用韦德国际的陣列，顺利获得代謝標記引入的疊氮基團的點擊化學來分析EV表面上的特定糖基化。在該方案中，ADSP的合成和ADSP硝化纖維膜陣列的製造可以在同一天完成。顺利获得30分鐘的孵育，從生物或臨床樣本中有效地捕獲EV，然後在3小時的窗口內進行免疫印跡分析，從而為EV分離和EV蛋白及其修飾的原位靶向分析给予了高通量平台。

2.Extracellular vesicles from the dead: the final message. 

死細胞的細胞外囊泡：最後的信息。

[Trends Cell Biol] PMID: 39438206

摘要：死亡細胞和鄰近細胞之間的溝通對於確保在細胞死亡時啟動適當的過程（如組織修復或炎症）至關重要。作為一種輔助細胞間通訊的機制，經歷凋亡的細胞可以釋放膜結合的細胞外囊泡（EV），稱為凋亡細胞衍生的EV（ApoEV），其可以顺利获得ApoEV內或上的生物分子影響下游過程。ApoEV根據大小被廣泛分類為被稱為凋亡小體（ApoBD）的大型ApoEV或小型ApoEV（s-ApoEV）。值得注意的是，ApoBD和s-ApoEV形成的機制不同，這兩個ApoEV亞群的功能也不同。本文重點介紹ApoBD和s-ApoEV的生物合成和功能特性，特別是在細胞清除、細胞信號傳導和疾病進展方面。

3.In situ visualization of endothelial cell-derived extracellular vesicle formation in steady state and malignant conditions. 

穩態和惡性條件下內皮細胞衍生的細胞外囊泡形成的原位可視化。

[Nat Commun] PMID: 39438460

摘要：內皮細胞是複雜生物體內所有血管系統的組成部分。當內皮細胞排列在血管壁上時，它們會不斷暴露在各種分子因素和剪切力下，從而引起細胞損傷和應力。然而，內皮細胞是如何被去除或消除不需要的細胞內容物的，现在尚不清楚。大細胞外囊泡（EV）的產生已成為從死亡或應激細胞中去除細胞廢物的關鍵機制。在這裏，韦德国际使用骨髓活體顯微鏡直接測量了在穩態和惡性條件下內皮細胞在體內形成EV的動力學。這些大型EV富含線粒體，暴露出「吃我」信號磷脂酰絲氨酸，並可以與免疫細胞群相互作用作為潛在的清除機制。循環EV水平升高與急性髓系白血病引起的骨髓血管系統退化有關。總之，韦德国际的研究给予了小鼠血管系統中EV形成的體內時空特徵，並表明循環的大內皮細胞衍生的EV可以给予遠端部位血管損傷的快照。

4.Bone aging and extracellular vesicles. 

骨老化和細胞外囊泡。

[Sci Bull (Beijing)] PMID: 39455324

摘要：骨老化是一個主要的全球健康問題，是骨量和力量的自然下降。同時，細胞外囊泡（EV），由細胞產生的微小膜結合顆粒，因其在各種生理過程和與年齡相關的疾病中的作用而得到認可。細胞外囊泡與骨老化之間的相互作用越來越受到關注，特別是它們對骨代謝的影響，隨着年齡的增長，骨代謝變得越來越重要。在這篇綜述中，韦德国际探討了EV的生物學、類型和功能，並強調了它們在骨老化中的調節作用。韦德国际研究了EV對骨代謝的影響，並強調了它們作為監測骨衰老進展的生物標誌物的潛力。此外，韦德国际還討論了細胞外囊泡的治療應用，包括靶向藥物輸送和骨再生，並解決了與細胞外囊泡療法相關的挑戰，包括技術複雜性和監管問題。韦德国际總結了现在關於EV在骨老化中作用的研究和臨床試驗，並提出了未來的研究方向。這些包括使用細胞外囊泡進行個性化醫療的潛力，以及將細胞外囊泡研究與先進技術相結合，以加強與年齡相關的骨骼健康管理。這一分析強調了細胞外囊泡在理解和管理骨老化方面的變革潛力，從而標誌着骨骼健康研究的重大進展。

5.Separation of small extracellular vesicles (sEV) from human blood by Superose 6 size exclusion chromatography. 

Superose 6尺寸排阻色譜法分離人血液中的小細胞外囊泡（sEV）。

[J Extracell Vesicles] PMID: 39441012

摘要：細胞外囊泡（EV）是液體活檢的重要靶點。然而，將基於EV的生物標誌物引入臨床實踐的嘗試並沒有達到預期的成功程度。這種失敗的原因之一是缺乏從複雜生物流體（如無細胞血漿或血清）中純化EV基線的可靠方法。由於現有的EV分離一步法不足以純化EV，因此對臨床樣本的大多數研究要麼是在EV和脂蛋白的混合物上進行的，而EV的實際數量及其個體特異性生物標誌物含量仍然難以捉摸，要麼是在數量少、體積足夠大的樣本上進行的。在這裏，韦德国际介紹了使用Superose6作為基質的快速蛋白質液相色譜法（FPLC），從幾乎不含可溶性蛋白質和脂蛋白的生物流體中取得小EV。除了對人類樣本中小EV的實際數量進行估計外，韦德国际還顯示了餐後階段持續時間對純化EV中脂蛋白比例影響的時間解像度，除了建議使用空腹樣本進行人體研究外，還提出了可接受的時間框架。此外，韦德国际評估了純EVs用於液體活檢的潛在價值，例如檢測從癌症患者血清中分離的純FPLC衍生級分中的EV-和腫瘤-生物標記物。不同技術之間的一致性表明，純細胞外囊泡中存在與疾病相關的生物標誌物，支持使用單囊泡分析進行液體活檢的可行性。

6.High-precision extracellular-vesicle isolation-analysis integrated platform for rapid cancer diagnosis directly from blood plasma. 

高精度細胞外囊泡分離-分析集成平台，可直接從血漿中快速診斷癌症。

[Biosens Bioelectron] PMID: 39442437

摘要：體液中癌源性細胞外小泡（sEV）有望成為癌症診斷的生物標誌物。對於基於sEV的液體活檢，顺利获得高純度和具有極高靈敏度的癌症-sEV檢測來分離sEV是至關重要的，因為體液包括密度高得多的正常細胞衍生的sEV和其他生物分子和生物製品。在此，韦德国际提出了一種基於電泳（DEP）-ELISA技術的分離分析-綜合癌症診斷平台，該平台能夠比傳統的ELISA方法高出三個數量級的靈敏度，並能夠從血漿中高精度地直接診斷癌症。人血漿中sEV的檢測限（LOD）低至10^4 sEV/mL，無需耗時且低產率的sEV分離和純化過程。該平台的能力顺利获得監測癌症細胞接種的小鼠並評估癌症-sEV抑制藥物的效果來驗證。使用開發的基於sEV的液體活檢，韦德国际診斷了來自健康捐贈者（N=39）和癌症患者（N=90）的臨床樣本。乳腺癌、結腸癌和肺癌的診斷準確率分別為94.2%、98.6%和91.3%。這種集成的sEV分離和分析平台可用於高靈敏度生物標誌物分析和基於sEV的液體活檢。

7.Real-time monitoring of small extracellular vesicles (sEVs) by in vivo flow cytometry. 

顺利获得體內流式細胞術實時監測細胞外小泡（sEVs）。

[J Extracell Vesicles] PMID: 39441010

摘要：細胞外囊泡（EV）是由活細胞釋放的雙層脂質膜組成的囊泡結構。越來越多的證據表明它們的功能，表明小EV（sEV）可以介導特定形式的細胞間通訊。sEVs的未來應用前景廣闊，不僅可以作為診斷標誌物，還可以作為治療劑。然而，sEV臨床轉化的最大困難是现在對它們的理解很差，特別是關於它們的體內行為。在這項研究中，韦德国际给予了一種基於體內流式細胞術（IVFC）監測血液循環中sEVs的新方法。韦德国际已經證明IVFC信號基線的高度與sEVs的濃度成正比。此外，韦德国际發現IVFC信號中的峰值是由sEVs的聚集或細胞攝取產生的。從血液中清除sEVs的體內監測表明，與非PEG化sEVs相比，PEG化sEV的停留時間更長，在循環中的聚集更少。這些研究表明，IVFC能夠實時監測循環sEV，這可以為sEV的藥代動力學和細胞靶向能力给予有價值的見解。

8.Netrin1-Enriched Exosomes From Genetically Modified ADSCs as a Novel Treatment for Diabetic Limb Ischemia. 

來自轉基因ADSCs的富含Netrin1的外泌體作為糖尿病肢體缺血的新療法。

[Adv Healthc Mater] PMID: 39440618

摘要：糖尿病肢體缺血（DLI）是糖尿病的常見併發症，也是非創傷性截肢的主要原因。支架置入和旁路手術等傳統治療方法可能並不適合所有患者。外泌體移植已成為一種有前景的治療方法。Netrin1是一種保護性心血管因子，在DLI中的作用尚不清楚。本研究調查了Netrin1在DLI患者中的作用，並評估了來自Netrin1過表達脂肪源性幹細胞（N-ADSCs）的外泌體的治療潛力。Netrin1在DLI患者的內皮細胞和血清中的表達顯著降低，突顯了其作為生物標誌物或治療靶點的潛力。在體外，富含Netrin1的外泌體（N-Exos）促進了人臍靜脈內皮細胞（HUVEC）的增殖、遷移、管形成，並在高糖條件下增強了對凋亡的抵抗力。這些保護作用是顺利获得PI3K/AKT/eNOS和MEK/ERK途徑介導的，N-Exos進一步促進了巨噬細胞從M1到M2的極化。在體內，N-Exos顯示出優於ADSC外泌體（Exos）的治療效果，包括增強血管生成、改善側支動脈重塑、減少炎症和肌肉保護。總的來說，這些發現將Netrin1確定為DLI的關鍵因素，並強調了其在疾病進展和治療策略中的重要性。N-Exos為DLI的治療给予了一種有前景的非細胞治療方法。

9.Omnidirectional improvement of mitochondrial health in Alzheimer's disease by multi-targeting engineered activated neutrophil exosomes. 

顺利获得多靶向工程化活化中性粒細胞外泌體全方位改善阿爾茨海默病線粒體健康。

[J Control Release] PMID: 39433157

摘要：阿爾茨海默病（AD）是一種嚴重的神經退行性疾病，影響着全球5000多萬人。多靶點治療已成為診斷和緩解AD發病過程的新療法；然而，现在的戰略因其效率不高而受到限制。在韦德国际的研究中，工程化的活化中性粒細胞來源的外泌體(MP@Cur-MExo)顺利获得靶向和減輕Aβ誘導的神經毒性來改善神經元中的線粒體功能。MP@Cur-MExo是來源於IL-8刺激的中性粒細胞的外泌體，其上裝飾有線粒體靶向配體和Aβ靶向配體修飾的SPION。工程外泌體可以被基質金屬肽酶-2切割，該酶在AD腦中過表達。因此，釋放的SPION和薑黃素負載的工程外泌體協同保護神經元細胞免受A誘導的線粒體缺陷。此外，MP@Cur-MExo從而允許顺利获得雙峰（MRI/IVIS）成像早期診斷AD。重要的是，在AD早期的小鼠模型中，靜脈注射MP@Cur-MExo恢複線粒體功能，減少Aβ誘導的線粒體損傷，從而減緩AD進展。總之，韦德国际設計的工程外泌體表明，線粒體功能的全方位改善可以作為診斷和治療神經退行性疾病的一種新穎實用的方法。這項研究還揭示了一種有前景的治療劑，可以在未來的臨床應用中阻止AD的進展。

10.Bacterial extracellular vesicles as intranasal postbiotics: Detailed characterization and interaction with airway cells. 

細菌胞外囊泡作為鼻內抗生素：詳細表徵和與氣道細胞的相互作用。

[J Extracell Vesicles] PMID: 39429019

摘要：大腸桿菌A034/86（EcO83）是一種益生菌菌株，用於新生兒預防醫院感染和腹瀉。這種細菌刺激促炎和抗炎細胞因子的產生，其鼻內給藥可減少小鼠的過敏性氣道炎症。儘管有好處，但由於潛在的全身感染和基因轉移，人們對使用活益生菌仍存在擔憂。來源於EcO83的細胞外囊泡（EV）可能為活細菌给予一種更安全的替代品。本研究對EcO83EV進行了表徵，並研究了它們與宿主細胞的相互作用，突出了它們作為後生物療法的潛力。按照細胞外囊泡研究的最低信息（MISEV）指南分離、純化和表徵EcO83EV。在人類鼻上皮細胞中進行的體外研究表明，EcO83EV增加了與氧化應激和炎症相關的蛋白質的表達，表明EV與宿主細胞之間存在有效的相互作用。對小鼠的進一步體內研究表明，EcO83EV與鼻相關淋巴組織相互作用，被氣道巨噬細胞內化，並刺激肺中的中性粒細胞募集。從機制上講，EcO83EV激活巨噬細胞NF-κΒ信號通路，導致一氧化氮的產生。EcO83EV作為活細菌的後生物替代品顯示出巨大的潛力，為治療應用给予了更安全的選擇。需要進一步的研究來探索它們的臨床應用，特別是在粘膜疫苗接種和靶向免疫治療策略中。

今天的整理就到這裏。希望大家可以有所收穫。大家下周見！